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    科研服务

    立足于生命科学,为基础研究领域科学工作者提供生物学高端技术服务

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    酵母文库构建(Smart 技术)

    SMART 技术是由 Clontech 于 1996 年开发的,SMART 技术的名称来源于 switching mechanism at 5’ end of RNA template 的缩写,最初用于构建哺乳动物 cDNA 文库,后来也用于构建酵母 cDNA 文库。SMART 技术的原理是利用反转录酶的模板切换活性,将特异性的序列加到 cDNA 的 5’端,从而提高全长克隆的效率。

    • 产品描述
    • 技术背景

      SMART 技术是由 Clontech 于 1996 年开发的,SMART 技术的名称来源于 switching mechanism at 5’ end of RNA template 的缩写,最初用于构建哺乳动物 cDNA 文库,后来也用于构建酵母 cDNA 文库。SMART 技术的原理是利用反转录酶的模板切换活性,将特异性的序列加到 cDNA 的 5’端,从而提高全长克隆的效率。

       

      技术原理

      技术优势

      1、起始 RNA 需求量小,适用于低丰富度表达基因

      2、经均一化,有效富集低丰度表达基因,避免冗余

      3、流程简单,操作快捷,易于开展实验

       

      样本要求

      样品类型 样品需求 保存条件(℃) 运输条件
      细胞样本 细胞数量大于 1*107 -80 干冰
      动物样本 大于 1 g -80 干冰
      植物样本 大于 2 g -80 干冰
      总 RNA 大于 200 μg -80 干冰

       

      服务内容

      核系统酵母文库(Smart 技术)
      服务内容 周期(工作日) 交付内容
      1、RNA 提取
      2、mRNA 提取
      5 天 1、酵母文库甘油菌各 4 m1( 分 4 管)
      2、酵母文库质粒(4 管大于 400 ug)
      3、Word 文档电子版项目报告 ( 含实验数据 )
      4、文库承诺达到以下指标 :
      文库库容量 >1*107
      CFU
      平均插入片段 0.8-1.5 kb(因物种而异)空载率 <5 %
      3、cDNA 合成与接头连接(三框文库)
      4、cDNA 均一化
      5、重组到酵母载体 pGADT7 上和电转化
      6、将获得的 cDNA 文库电转化至大肠杆菌感
      受态细胞中进行克隆扩增
      7、文库检测和质粒提取
      8、数据整理和分析
      17 天
      9、转录组测序、文库全测序、GO+KEGG 分析 15 天

       

      膜系统酵母文库(Smart 技术)
      服务内容 周期(工作日) 交付内容
      1、RNA 提取
      2、mRNA 提取
      5 天 1、酵母文库甘油菌各 4 m1( 分 4 管)
      2、酵母文库质粒(4 管大于 400 ug)
      3、Word 文档电子版项目报告 ( 含实验数据 )
      4、文库承诺达到以下指标 :
      文库库容量 >1*107
      CFU
      平均插入片段 0.8-1.5 kb(因物种而异)空载率 <5 %
      3、cDNA 合成与接头连接(三框文库)
      4、cDNA 均一化
      5、重组到酵母载体 pPR3-N 上和电转化
      6、将获得的 cDNA 文库电转化至大肠杆菌感
      受态细胞中进行克隆扩增
      7、文库检测和质粒提取
      8、数据整理和分析
      17 天
      9、转录组测序、文库全测序、GO+KEGG 分析 15 天

       

       

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